可見分光光度計的光源由一只6V或者12V、10W 或30W的溴鎢燈,承擔(dān)有紫外光部分的還要增加一只氘燈。這些光源在使用一段時間后會老化,表現(xiàn)為亮度下降,這時就要更換一只電壓、瓦數(shù)及形狀相同的燈泡,平日也不應(yīng)將可見分光光度計的透光率(T)調(diào)至****。由于每種燈泡的幾何尺寸不可能完全一致,更換時有必要調(diào)整燈的位置。氘燈的更換和溴鎢燈不太一樣,需要把卡紙放在入射光處調(diào)節(jié)燈的位置使圓型光斑圓亮且要處于中心位置。每次更換燈泡后還要做波長的校正,可見光部分用鐠釹玻璃濾光片529 nm, 吸收峰來校正在5-10 nm內(nèi),吸收示值大點是529 nm 實際波長,實際波長刻度也要在儀器允許誤差范圍內(nèi)。校正波長后,還要測試新光源的穩(wěn)定性。
方法是用一濾光片插人比色杯架中間,機器預(yù)熱30 min,然后間隔時間連續(xù)讀數(shù)并觀察讀數(shù)的變化是否符合可見分光光度計的出廠標(biāo)準(zhǔn)。如讀數(shù)重復(fù)性較差需重新更換燈泡并重復(fù)以上工作。紫外光部分方法基本與可見光相同,不同點是利用氘燈的特征譜線486.0 nm和656.1 nm 進行校正。先將波長調(diào)至待測波長附近,再將透光率t調(diào)至50%后緩緩增加或減少波長,同時觀察透光率的變化,在待測波長附近透光率高一點便是正確的波長位置。要特別注意在更換燈泡時一定要帶上棉手套,以免讓指印污染燈泡表面影響了燈泡亮度。
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